Thanh bên bài viết
Số lượt xem chi tiết bài báo: 20
Đánh giá ảnh hưởng của nồng độ Trypsin - Edta đến hiệu quả tách tế bào và bảo toàn cấu trúc da trong chế tạo tấm trung bì da đồng loại không tế bào
Nội dung chính của bài viết
Tóm tắt
Tấm trung bì da người không tế bào (hADM) là vật liệu sinh học có nguồn gốc từ da người, được loại bỏ hoàn toàn lớp biểu bì và các thành phần tế bào của lớp trung bì, trong khi vẫn giữ lại cấu trúc collagen của trung bì.
Mục tiêu: Đánh giá ảnh hưởng của nồng độ enzyme Trypsin - EDTA đến hiệu quả tách tế bào và mức độ bảo toàn cấu trúc trung bì, nhằm xác định nồng độ tối ưu trong quy trình chế tạo hADM.
Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu được thực hiện trên 30 mẫu da người hiến, chia ngẫu nhiên thành 3 nhóm (n = 10), xử lý với 3 nồng độ Trypsin - EDTA khác nhau: 0,5X (0,125%), 1X (0,25%) và 1,5X (0,375%). Mỗi mẫu trải qua quy trình đông - rã, sau đó được xử lý enzyme hai bước: Ngâm ở 40C trong 24 giờ, rồi ủ ở 370C trong 3 giờ. Hiệu quả tách biểu bì và loại bỏ tế bào được đánh giá bằng chỉ số tách biểu bì và phân tích mô học.
Kết quả: Tăng nồng độ Trypsin - EDTA có mối tương quan rõ rệt với tỷ lệ tách biểu bì cao hơn sau xử lý enzyme ở 40C trong 24 giờ (p < 0,05), lần lượt là 15,24 ± 8,94%; 36,84 ± 7,44% và 45,99 ± 7,10%. Sau xử lý enzyme ở 370C trong 3 giờ, tỷ lệ tách biểu bì tiếp tục tăng, tương ứng từ 28,25 ± 10,33% đến 93,98 ± 13,08% và 95,47 ± 11,99%; tuy nhiên sự khác biệt giữa nhóm 1X và 1,5X không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05). Hình ảnh mô học xác nhận loại bỏ hoàn toàn tế bào ở cả ba nhóm. Tuy nhiên, nhóm 1,5X cho thấy cấu trúc collagen bị phá vỡ nhiều hơn, mật độ sợi giảm và phân bố lỏng lẻo hơn.
Kết luận: Trypsin - EDTA là enzyme hiệu quả trong tách biểu bì và loại tế bào khi chế tạo hADM. Nồng độ 0,25% (1X) được xác định là tối ưu, giúp đạt hiệu quả loại bỏ tế bào cao đồng thời bảo tồn tốt cấu trúc collagen.
Chi tiết bài viết
Từ khóa
Trung bì không tế bào, khử tế bào, Trypsin - EDTA, da đồng loại, công nghệ mô
Tài liệu tham khảo
2. Chen Y., Liu X., Zheng X., et al (2022) Advances on the modification and biomedical applications of acellular dermal matrices. Journal of Leather Science and Engineering, 4 (1), 19.
3. Liang R., Pan R., He L., et al (2025) Decellularized Extracellular Matrices for Skin Wound Treatment. Materials, 18 (12): 2752.
4. I saeva E.V., Beketov E.E., Arguchinskaya N.V., et al (2022) Decellularized extracellular matrix for tissue engineering. Современные технологии в медицине, 14 (3) (eng): 57-68.
5. Moffat D., Ye K. and Jin S. (2022) Decellularization for the retention of tissue niches. Journal of tissue engineering, 13, 20417314221101151.
6. Correa-Araujo L., Prieto-Abello L., Lara-Bertrand A., et al (2023) Bioengineered skin constructs based on mesenchymal stromal cells and acellular dermal matrix exposed to inflammatory microenvironment releasing growth factors involved in skin repair. Stem Cell Research & Therapy, 14 (1): 306.
7. Novotna O., Novakova Z. V., Galfiova P., et al (2023) Decellularization techniques of human foreskin for tissue engineering application. Physiological Research, 72 (Suppl 3), S287.
8. Ścieżyńska A., Nogowska A., Sikorska M., et al (2019) Isolation and culture of human primary keratinocytes a methods review. Experimental dermatology, 28 (2): 107-112.
9. Dussoyer M., Michopoulou A. and Rousselle P. (2020) Decellularized Scaffolds for Skin Repair and Regeneration. Applied Sciences, 10 (10), 3435.